En 1853, les troupes russes sous le commandement du général Perovsky, après avoir parcouru 900 miles sur un terrain sans eau, ont pris d'assaut la forteresse de Kokand Ak-Mechet, qui couvrait toutes les routes vers l'Asie centrale. Trois cents cosaques de l'Oural et deux cents d'Orenbourg participèrent à la campagne. La forteresse a été rebaptisée Fort Perovsky et la construction de la ligne Syr-Darya a commencé, qui était censée couvrir le territoire de la mer d'Aral au Bas-Oural contre les raids. En 1856, la construction de fortifications commence du fort Perovsky au fort Verny, afin de couvrir 900 verstes de steppe et de relier la ligne Syr-Darya et la Sibérie, pour établir la communication entre les troupes sibériennes, de l'Oural et d'Orenbourg, qui pour protéger une zone de 3 500 verstes. En 1860, les troupes de Kokand tentent de s'emparer de Verny, mais les cosaques de Sibérie et de Semirechye repoussent cette attaque. En 1864, les troupes russes ont occupé Chimkent et ont vaincu le peuple Kokand. Les habitants de Kokand rassemblent le reste de leurs forces et lancent un raid contre les troupes russes dans la forteresse du Turkestan, mais en chemin, ils tombent sur une centaine de cosaques de l'Oural, Esaul Serov. Dans une bataille de trois jours à Ikan, les Cosaques repoussèrent l'attaque de toute l'armée de Kokand. Sur les 110 Cosaques, 11 ont survécu, 47 ont été blessés, 52 ont été tués.
En 1865, les troupes russes et les cosaques de l'Oural occupèrent Tachkent. La région du Turkestan est établie. En 1866, les hostilités commencèrent contre l'émir de Boukhara revendiquant Tachkent. Le raid de Boukharie fut repoussé. En 1868, les troupes russes du général Kaufman, qui comprenaient les cosaques de l'Oural, se rendirent à Samarkand et l'émir de Boukhara se rendit, reconnaissant le protectorat de la Russie.
Cosaques d'Orenbourg lors de la conquête du Turkestan
En 1869, les troupes russes de Transcaucasie débarquèrent sur la côte orientale de la mer Caspienne. En 1873, une campagne est organisée contre Khiva, le plus grand centre de traite négrière d'Asie centrale. À travers le désert sans eau, les troupes s'approchent de Khiva de trois côtés - du Turkestan, de la ligne d'Orenbourg et de la côte caspienne. Des cosaques de Sibérie et de Semirechye, cinq cents Ourals, douze cents habitants d'Orenbourg, les régiments Kizlyar-Grebensky et Sunzha-Vladikavkaz du Terek et même une partie du régiment Yeisk de l'armée du Kouban participent à la campagne. Pendant la campagne, la nature elle-même a été vaincue. Puis Khiva a été prise d'assaut les 28 et 29 mai. En 1875, les cosaques d'Orenbourg, de l'Oural, de Sibérie et de Semirechye ont aidé les troupes russes à capturer Kokand.
Le Turkestan et la région transcaspienne, où la puissance russe se consolide, sont divisés par la steppe turkmène, dont la population nomade continue de piller. Avant l'oasis, où se trouvait le bastion des Turkmènes - Geok-Tepe, il y avait un désert de 500 verstes. En 1877 et 1879. Les troupes russes ont tenté à deux reprises en vain d'occuper cette forteresse. En 1880, le général Skobelev commença une campagne contre Geok-Tepe depuis la côte caspienne. Avec lui se trouvent les 1er régiments Labinsky, 1er Poltava et 1er Taman de l'armée cosaque du Kouban. Un détachement du général Kouropatkine, qui comprend les cosaques d'Orenbourg et de l'Oural, se dirige vers Skobelev depuis le Turkestan. Les détachements se réunissent à Geok-Tepe. Le siège de la forteresse débute le 23 décembre 1880, et le 12 janvier 1881, elle est prise d'assaut. Pour cette bataille, le 1er régiment Taman du Kouban a reçu la bannière Saint-Georges. Ainsi, toute l'Asie centrale a été annexée à la Russie.